De nos jours, pour découvrir ou valider une nouvelle cible biologique, une des premières démarches consiste bien souvent à se procurer une chimiothèque de petites molécules et à identifier par criblage celle(s) qui seront active(s) sur la cible ou sur la cellule entière. À ce stade, le critère qui préside souvent au choix d’une chimiothèque est « de combien de molécules dispose cette chimiothèque, en aurai-je assez pour que le criblage soit un succès ? ». Ce réflexe signifie que l’on considére que l’accroissement du nombre de molécules testées influencerait de facto les chances de succès. Ce n’est pas faux, mais c’est insuffisant. Il serait plus judicieux de se poser la question suivante : quelle diversité structurale caractérise cette chimiothèque ? Cribler une chimiothèque qui possède la même structure centrale, c’est-à-dire dont tous les composés appartiennent à une même famille, risque de produire des réponses limitées à cette famille, alors que le but du criblage est justement d’aller chercher de nouvelles réponses. Pour combler cette lacune, il convient de disposer d’une chimiothèque qui puisse couvrir tout l’espace tridimensionnel inoccupé, tout en faisant varier les groupements fonctionnels dans toutes les directions de l’espace. Depuis les années 2000, des chercheurs se sont lancés ce nouveau défi, celui de la synthèse orientée vers la diversité (DOS en anglais pour diversity oriented synthesis) [1, 2], qui consiste à couvrir au maximum tout l’espace tridimensionnel en élaborant des stratégies qui accroissent la diversité moléculaire tout en limitant au maximum le nombre d’étapes de synthèse. Avant d’aborder ce concept, il convient d’établir les paramètres qui définissent et quantifient la diversité structurale.

Quels sont les leviers pour créer de la diversité au niveau moléculaire ? Il est possible de décomposer ces leviers en éléments de diversité pour mieux comprendre leur implication [3]. Ainsi, le chimiste s’appuie sur trois éléments principaux pour créer de la diversité structurale : la diversité liée aux blocs constitutifs, à la stéréochimie et au squelette central.

Élément de diversité de fragments ou blocs constitutifs

La synthèse du motif 1,4-dihydropyridine [4] est un bon exemple pour expliquer la diversité liée aux blocs constitutifs. Ce motif se retrouve dans bon nombre de chimiothèques de synthèse, et a déjà contribué à la découverte de nouvelles têtes de série, notamment des modulateurs de canaux calcique [5]. La condensation de β-céto-esters, d’anilines et d’aldéhydes α,β-insaturés ( Figure 1, 1, 2 et 3 respectivement) permet d’obtenir, en présence d’un catalyseur chiral (4), des 1,4-didydropyridines (5) présentant une grande variabilité des substituants R¹, R², R³ et R⁴. Cette réaction est appelée réaction multicomposé (MCR en anglais pour multi-component reaction) : au moins trois réactants variables différents (ici la réaction est à trois composés 1, 2 et 3) vont réagir pour s’unir et former un produit 5 sélectivement. De la combinaison de ces réactants, une multitude de composés de type 5 peuvent être obtenus. L’inconvénient de cette approche est que la diversité moléculaire est restreinte à la variation des blocs constitutifs autour d’un squelette central commun. Les réactions de ce type « multicomposés » ont été très largement employées pour créer de grandes chimiothèques, qui présentent cependant peu de variabilité tridimensionnelle.

Figure 1. Diversité liée aux blocs constitutifs. 1,4-didydropyridines obtenues par condensation de β-céto-esters, d’anilines et d’aldéhydes α, β-insaturés en présence d’un catalyseur chiral.

Figure 1. Diversité liée aux blocs constitutifs. 1,4-didydropyridines obtenues par condensation de β-céto-esters, d’anilines et d’aldéhydes α, β-insaturés en présence d’un catalyseur chiral.

Élément de diversité stéréochimique

Dans l’exemple précédent, il faut remarquer que le produit final possède un nouveau centre asymétrique (symbolisé par *) et que la réaction a été réalisée dans des conditions énantiosélectives, c’est-à-dire que seul l’énantiomère 5 est obtenu (l’autre énantiomère ent-5, qui est son image en miroir, n’est, lui, pas formé). Les énantiomères¹5 et ent-5 sont deux molécules structurellement différentes car non superposables. Le fait de créer des centres asymétriques (appelés aussi centres sp3) génère de la complexité moléculaire, et donc accroît facilement la diversité moléculaire. Sans le centre asymétrique *, le produit 5 serait plan (dans le plan de la feuille). Grâce à ce centre, le groupement R³ sort du plan (en arrière du plan de la feuille) et la molécule prend ainsi une forme plus « tridimensionnelle ». La chiralité¹ est donc un facteur d’accroissement de la complexité tridimensionnelle qui accentue le potentiel de diversification morphologique. Des chercheurs ont récemment démontré qu’accroître le nombre de centres chiraux dans une chimiothèque avait un impact positif sur la sélectivité et la fréquence des hits [6].

Au cours d’une réaction, le chimiste est capable de créer plusieurs nouveaux centres asymétriques en ayant un contrôle sur chacun d’eux. Dans le contexte de la diversification spatiale, le défi est de réaliser de la divergence stéréochimique, c’est-à-dire d’aboutir à un squelette central identique, mais qui présente des stéréochimies (les centres chiraux) différentes (les produits obtenus sont alors des diastéréoisomères). Leur substituants sont donc orientés dans différentes directions de l’espace, ce qui aboutit à des formes tridimensionnelles nouvelles. La réaction multicomposé de Petasis illustre parfaitement cette notion de divergence stéréochimique qui est réalisée de façon simple, sélective et efficace (Figure 2) [7]. Le dérivé d’acide aminé 6, possédant un centre chiral (*) et le réactant acide boronique 7 sont mis en réaction avec le dérivé chiral 8 ou son énantiomère ent-8, ce qui conduit à former sélectivement et respectivement 9 ou 10. Les composés 9 et 10 sont diastéréoisomères l’un par rapport à l’autre et ont une morphologie tridimensionnelle différente, comme l’illustrent les représentations à droite de la Figure 2 . Leur nouveau centre asymétrique (*) est totalement contrôlé par l’induction chirale du centre asymétrique portée par 8 ou ent-8.

Figure 2. Réaction multicomposé de Petasis et notion de divergence stéréochimique.

Figure 2. Réaction multicomposé de Petasis et notion de divergence stéréochimique.

Éléments de diversité de squelette

Le chimiste peut aussi explorer la diversité morphologique à travers la formation de différents squelettes centraux. Un très joli exemple est illustré par le précurseur central 11 (Figure 3) [8]. En seulement une étape à partir de 11, et selon le réactif utilisé, voire dans certains cas sa quantité, il est possible d’aboutir à une grande variété de squelettes qui présentent des morphologies linéaires, circulaires ou globulaires.

Figure 3. Éléments de diversité de squelette. Créer une grande variété de formes tridimensionnelles en une ou deux étapes à partir d’un précurseur central 11.

Figure 3. Éléments de diversité de squelette. Créer une grande variété de formes tridimensionnelles en une ou deux étapes à partir d’un précurseur central 11.

Bien souvent, une chimiothèque est conçue en plusieurs étapes de synthèse. Pour atteindre une morphologie variée en peu d’étapes, la synthèse orientée vers la diversité exploite la possibilité de combiner les éléments de diversité entre eux. Une des approches appelées BCP (build/couple/pair) consiste à assembler d’abord les fragments variables (assemblage, par exemple ici la réaction multicomposé de Petasis, Figure 4 ) pour créer un motif central, puis à greffer sur ce dernier un nouveau fragment variable (couplage, soit par le fragment 12 ou 13) possédant des fonctionnalités réactives latentes différentes, et capable de réagir ultérieurement avec d’autres fonctions de la molécule (appariement) pour aboutir à de nouveaux squelettes inédits [9]. Les stratégies de divergence, qu’elles soient stéréochimique (la diastéréodivergence de la réaction multicomposé de Petasis à la 1^re étape) ou de squelette (3^e étape et plus), induisent à chaque fois un profond remodelage tridimensionnel sur les molécules obtenues.

Figure 4. Recombinaison des éléments de diversité. Évaluation de la morphologie de chaque molécule représentée sur un graphe par le calcul de leur moment d’inertie principal.

Figure 4. Recombinaison des éléments de diversité. Évaluation de la morphologie de chaque molécule représentée sur un graphe par le calcul de leur moment d’inertie principal.

Il est possible d’évaluer la morphologie de chaque molécule en calculant son moment d’inertie principal, qui, une fois normalisé, peut être représenté sur un graphe sous la forme d’un triangle (Figure 4) [10, 11]. Ainsi, les molécules situées dans la partie en haut à gauche ont une forme plutôt linéaire, celles en bas plutôt plane, et celles en haut à droite, globulaire. Les chimiothèques de synthèse dites classiques (en rouge) sont localisées la plupart d’entre elles dans la zone comprise entre la forme linéaire et plane.[10] Dans le cas de notre exemple, deux chimiothèques différentes ont été produites en 3 à 5 étapes seulement. La chimiothèque DOS 2 (en bleu) couvre une bonne partie gauche du triangle, alors que la chimiothèque DOS 1 (en vert) occupe l’autre moitié (plus globulaire). Ainsi, à partir de précurseurs communs, il est possible d’occuper quasiment tout l’espace tridimensionnel en peu d’étapes synthétiques pour aboutir à une chimiothèque morphologiquement diverse.

L’approche BCP a été utilisée pour créer une chimiothèque de plus de 14 400 macrocycles présentant une grande diversité au niveau de leur stéréochimie et de leur squelette central [12]. Leur criblage a permis la découverte d’une nouvelle classe d’inhibiteurs d’histone désacétylase (HDAC). Cette chimiothèque occupe un espace chimique qui peut être rapproché de celui de la chimiothèque DOS 1 (en vert) (voir exemple précédent, Figure 4 ), c’est-à-dire que les molécules présentent un aspect qui oscille entre les formes plan et globulaire.

Dans un autre registre, il est possible d’appliquer les principes de la synthèse orientée vers la diversité, en termes d’économie d’étape et de diversification, à une approche orientée vers une structure plus ciblée (target oriented synthesis [TOS]) ou pour des applications plus médicales (function oriented synthesis [FOS]) [13].

Notre laboratoire s’intéresse à l’analyse et à la compréhension des relations structures-activités des inhibiteurs d’HDAC appliqués au traitement de maladies parasitaires intracellulaires, en particulier celles qui sont liées à la famille des Apicomplexes (notamment Toxoplasma gondii et Plasmodium falciparum, agents responsables respectivement de la toxoplasmose et du paludisme). Le but est d’optimiser un composé qui puisse agir sur le parasite sans toucher l’hôte. Dans cette optique, nous nous sommes inspirés d’un produit naturel cyclotétrapeptide, qui présente une très bonne activité inhibitrice sur T. gondii. L’index thérapeutique reste néanmoins faible. C’est dans ce contexte que nous avons développé une stratégie, inspirée de la synthèse orientée vers la diversité, qui nous permette à la fois (1) de combiner les fragments variables à volonté entre la partie cyclopeptidique ( Figure 5 , 14, en gris) avec soit une partie cétonique (15, en bleu), soit une partie thioester (16, en violet), en 1 à 2 étapes, pour donner respectivement 17 ou 18 ; et (2) de modifier leur squelette cyclotétrapeptidique à 12 chaînons en depsipeptide cyclique à 15 chaînons (19) en seulement une étape [14].

Figure 5. Stratégie inspirée de la ­synthèse orientée vers la diversité en vue de faciliter la pharmacomodulation d’inhibiteurs d’histone désacétylase.

Figure 5. Stratégie inspirée de la ­synthèse orientée vers la diversité en vue de faciliter la pharmacomodulation d’inhibiteurs d’histone désacétylase.

À partir de cette chimiothèque réduite, nous avons pu sonder efficacement notre cible (HDAC3) et obtenir de nouvelles données sur les relations structures-activités. Parmi les nouveaux inhibiteurs 17, certains avaient une activité inhibitrice nanomolaire sur des cellules et un meilleur index thérapeutique que celui du produit naturel de réference. De façon inattendue, certains des dérivés thioester 18 ont montré une sélectivité inversée, c’est-à-dire une inhibition forte sur les cellules humaines sans effet sur le parasite. Si l’on modifiait le squelette des composés bioactifs les plus représentatifs 17 et 18 en dérivés cyclodepsipeptides 19, ceux-ci avaient perdu leur activité inhibitrice, soulignant le rôle primordial de la structure cyclotétrapeptide dans l’efficacité de ces molécules in cellulo.

Les performances des plate-formes robotisées actuelles offrent des perspectives de criblage à très haut débit. Pour que les campagnes de criblages soient encore plus performantes, il est opportun d’être très attentif à la qualité de la chimiothèque (grandes diversités structurales et fonctionnelles). Grâce à des outils d’analyse de la diversité moléculaire, il nous est possible d’évaluer cette qualité. Celle-ci est garante d’une chimiothèque riche en contenus d’informations structures-activités concernant la cible biologique visée. La synthèse orientée vers la diversité a pour but de concevoir des stratégies de synthèses nouvelles, qui permettent d’accéder facilement à des chimiothèques réellement diversifiées et riches en informations pour accélérer la découverte d’entités bioactives innovantes.

Les auteurs déclarent n’avoir aucun lien d’intérêt concernant les données publiées dans cet article.