L’étude des formes mendéliennes d’hypertension artérielle, a permis des avancées remarquables dans la compréhension des mécanismes de régulation de la pression artérielle, en dépit de la rareté de ces formes. L’hypertension hyperkaliémique familiale (HHF), aussi connue sous le terme de syndrome de Gordon ou de pseudo-hypoaldostéronisme de type 2, est une de ces formes rares d’hypertension artérielle, transmise essentiellement selon un mode autosomique dominant [ 1]. Les sujets atteints présentent des anomalies métaboliques associant hyperkaliémie, acidose métabolique et hyperchlorémie en l’absence de toute insuffisance rénale. Ces désordres métaboliques, associés à la grande efficacité des diurétiques thiazidiques révèlent une anomalie primaire de réabsorption ionique au niveau du rein.

En 2001, nous avions identifié, en collaboration avec l’équipe de R.P. Lifton (Université de Yale, New Haven, États-Unis), les deux premiers gènes responsables de cette pathologie [ 2]. Ces deux gènes, WNK1 et WNK4 (With no K [lysine]), codent pour deux sérine thréonine kinases de structure et d’expression particulièrement complexes [ 3]. Par la suite, des études in vitro puis in vivo ont montré les fonctions activatrices et inhibitrices de WNK1 et WNK4 sur plusieurs transporteurs ioniques, en particulier le cotransporteur Na⁺-Cl^-, NCC [ 4].

Cependant, les mutations trouvées dans les gènes WNK1 et WNK4 n’expliquent qu’une partie minoritaire des cas décrits. Un ou plusieurs autres gène(s) devrai(en)t donc être également responsable(s) de cette pathologie. Deux publications récentes viennent de combler cette lacune en identifiant le rôle essentiel d’un mécanisme moléculaire de dégradation protéique par ubiquitination dans la régulation du transport ionique et de la pression artérielle [ 5, 6]. Les deux équipes - dont la nôtre - ont utilisé les outils modernes de la génétique humaine, en particulier des études d’exome entier, pour la recherche de mutations codantes dans une pathologie rare.

Notre étude a associé deux stratégies : une étude de liaison classique par Lod score ^1, et la recherche de variants codants par analyse d’exome entier [6]. La recherche d’un intervalle de liaison a été effectuée à partir de deux familles qui ne présentaient pas de mutations dans les gènes WNK1 et WNK4. L’une d’entre elles a été recrutée dans le département de génétique de l’hôpital européen Georges Pompidou (HEGP) à Paris (Dr X. Jeunemaitre), l’autre à l’institut du thorax à Nantes (Inserm UMR 915, Dr J.J. Schott). Une seule région était commune aux deux familles (5q31.2) avec un Lod score cumulé très significatif (9,0). Cette étude de liaison a été complétée par un séquençage d’exome entier chez trois cas atteints et un sujet non atteint de chaque famille. Un seul gène, KLHL3 (Kelch-like 3), présentait, chez les cas atteints des deux familles, des mutations faux-sens considérées comme pathogènes par plusieurs logiciels de prédiction bioinformatique. L’implication du gène KLHL3 a pu être rapidement vérifiée par la coségrégation mutation-pathologie dans les deux familles initiales et par l’identification de 14 autres mutations faux-sens supplémentaires chez 17 autres sujets atteints non apparentés. Dans 13 cas, la mutation était présente à l’état hétérozygote, en accord avec la transmission dominante attendue. Dans quatre cas issus de familles consanguines, la mutation était présente à l’état homozygote, correspondant à une forme apparemment récessive [6]. L’expression forte de KLHL3 dans le néphron et sa colocalisation avec le cotransporteur NCC dans le tubule contourné distal renforçaient les arguments de causalité de ce gène dans la pathologie.

À la même période, une équipe américaine identifiait indépendamment par analyse d’exome entier le même gène, KLHL3, comme responsable de la pathologie [5]. Elle répertoria 24 mutations différentes, la plupart faux-sens, mais également non-sens, petites délétions et mutations d’épissage. Seize mutations étaient présentes à l’état hétérozygote, huit à l’état homozygote ou hétérozygote composite, expliquant ainsi la présentation parfois dominante ou récessive de la pathologie. L’ensemble des mutations KLHL3 retrouvées par les deux équipes sont indiquées dans la Figure 1 . De plus, l’équipe de R.P. Lifton montrait la présence de mutations hétérozygotes du gène Cullin-3 chez 17 autres sujets atteints. Ces mutations, survenant pour la plupart de novo, étaient détectées dans des formes plus sévères de la pathologie. Toutes correspondaient à des mutations d’épissage de l’exon 9 du gène Cullin-3. Nous avons confirmé par la suite ce même type de mutations chez sept sujets atteints, ayant aussi une forme précoce et sévère de la pathologie.

Figure 1. Schéma de la protéine KLHL3 et localisation de l’ensemble des mutations retrouvées dans l’hypertension hyperkaliémique familiale. La protéine KLHL3 est composée de 3 domaines différents : un domaine BTB (Bric-à-brac, Tramtrack, Broad complex), responsable de la dimérisation de la protéine ; un domaine BACK (BTB and carboxy-terminal Kelch) et un domaine KELCH, composé de 6 motifs Kelch formant une hélice à 6 pales de feuillets β. Les 37 mutations différentes (22 hétérozygotes et 15 homozygotes représentées en gras) sont essentiellement des mutations faux-sens situées dans le domaine KELCH [5, 6].

Figure 1. Schéma de la protéine KLHL3 et localisation de l’ensemble des mutations retrouvées dans l’hypertension hyperkaliémique familiale. La protéine KLHL3 est composée de 3 domaines différents : un domaine BTB (Bric-à-brac, Tramtrack, Broad complex), responsable de la dimérisation de la protéine ; un domaine BACK (BTB and carboxy-terminal Kelch) et un domaine KELCH, composé de 6 motifs Kelch formant une hélice à 6 pales de feuillets β. Les 37 mutations différentes (22 hétérozygotes et 15 homozygotes représentées en gras) sont essentiellement des mutations faux-sens situées dans le domaine KELCH [5, 6].

Modèle d’interaction entre KLHL3-culline-3 et NCC

Un modèle schématique d’interaction entre Kelch-like 3-culline-3 et NCC est résumé dans la Figure 2 . Kelch-like 3 et culline-3 participent à la structure d’un complexe E3 ligase ayant pour cible le cotransporteur NCC dans le néphron distal. En l’absence de mutation, ce complexe permet la dégradation par le protéasome d’une partie des protéines NCC produites dans le réticulum endoplasmique. En présence de mutations des gènes KLHL3 ou Cullin-3, l’interaction des protéines avec leur substrat NCC est altérée et la dégradation du cotransporteur via le protéasome est réduite. En conséquence, un plus grand nombre de molécules NCC seraient présentes à la membrane, entraînant l’augmentation de l’activité de réabsorption rénale d’ions Na⁺ et Cl^-. Cette activité accrue de NCC rend compte de la grande sensibilité des patients aux diurétiques thiazidiques, NCC étant la cible privilégiée de ces agents pharmacologiques.

Figure 2. Modèle proposé pour expliquer les modifications d’expression du cotransporteur NCC en présence de mutations des gènes KLHL3 et Cullin-3. Un schéma d’un tubule rénal est représenté à gauche. Le cotransporteur Na+-Cl- (NCC) est exprimé dans le tube contourné distal (DCT). Au niveau cellulaire, KLHL3 et culline-3 participent à la régulation de son activité via un processus d’ubiquitination. Culline-3 est une protéine appartenant au complexe E3 ubiquitine ligase dégradant les protéines via le protéasome après ubiquitination. KLHL3 est un partenaire d’interaction de la culline-3, essentiel pour la reconnaissance des substrats, dont NCC. Dans le cas de l’hypertension hyperkaliémique familiale, les mutations de KLHL3 ou culline-3 empêchent l’interaction de NCC avec le complexe E3 ligase, diminuant ainsi sa dégradation, ce qui a pour conséquence une augmentation de son expression et de son activité à la membrane, et donc une absorption accrue de NaCl. CCD : cortical collecting duct ; DCT : distal convoluted tubule ; PCT : proximal convoluted tube ; TAL : thick ascending limb of the loop of Henle.

Figure 2. Modèle proposé pour expliquer les modifications d’expression du cotransporteur NCC en présence de mutations des gènes KLHL3 et Cullin-3. Un schéma d’un tubule rénal est représenté à gauche. Le cotransporteur Na+-Cl- (NCC) est exprimé dans le tube contourné distal (DCT). Au niveau cellulaire, KLHL3 et culline-3 participent à la régulation de son activité via un processus d’ubiquitination. Culline-3 est une protéine appartenant au complexe E3 ubiquitine ligase dégradant les protéines via le protéasome après ubiquitination. KLHL3 est un partenaire d’interaction de la culline-3, essentiel pour la reconnaissance des substrats, dont NCC. Dans le cas de l’hypertension hyperkaliémique familiale, les mutations de KLHL3 ou culline-3 empêchent l’interaction de NCC avec le complexe E3 ligase, diminuant ainsi sa dégradation, ce qui a pour conséquence une augmentation de son expression et de son activité à la membrane, et donc une absorption accrue de NaCl. CCD : cortical collecting duct ; DCT : distal convoluted tubule ; PCT : proximal convoluted tube ; TAL : thick ascending limb of the loop of Henle.

Les auteurs déclarent n’avoir aucun lien d’intérêt concernant les données publiées dans cet article.