Les techniques de cytogénétique moléculaire : principes et progrès.

Abstract

La cytogénétique moléculaire est une nouvelle approche morphologique qui utilise à la fois les outils de la biologie moléculaire et de la cytogénétique. La principale technique utilisée actuellement est l.hybridation in situ fluorescente (FISH) qui consiste en l'hybridation de sondes froides d'ADN sur des lames de préparations cytogénétiques de cellules métaphasiques ou interphasiques et sa révélation par fluorescence. Initialement utilisée pour localiser certaines séquences répétées de l.ADN sur des chromosomes métaphasiques, son champ d.application s'est progressivement diversifié. Elle constitue actuellement un outil puissant et performant dans l'établissement de la carte du génome humain, l'analyse des processus tumoraux et le diagnostic chromosomique prénatal et post-natal.

The use of molecular cytogenetic approaches based on fluorescence in situ hybridization (FISH) has increased in recent years. They are a powerful tool for basic research on genome organization and mapping as well as for diagnosis applications. In prenatal, constitutional and cancer genetics, detection and identification of chromosomal rearrangements that are causally related to genetic diseases improve diagnosis and contribute to therapy decision. However numerical and structural chromosome aberrations that escape conventional chromosome banding analysis such subtile translocations, small markers and complex chromosomal rearrangements need exploration with FISH techniques. Using specific DNA probes (whole chromosome painting, subchromosomal regions or gene-specific probes), it is possible to analyse a fraction of the genome and to confirm the presence of already suspected chromosomal aberrations. More recently global approaches for detection of chromosomal material imbalances of the entire genome have been developped comparative genomic hybridization (CGH) and multicolor FISH (M-FISH, SKY.). In this paper we review the principles of molecular cytogenetic approachs and the advances established by improved techniques of fluorescence in situ hybridization.